Collagen, Type I, from Rat Tail 鼠尾膠原蛋白I

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Extracellular Matrix (ECM) 細胞外基質；Gelatin 明膠；Collagen Type I 膠原蛋白I型；Poly-L-lysine 多聚L-賴氨酸；Fibronectin 纖連蛋白；Matrigel基質膠； CAS：9007-34-5 ；

產品信息：

基本介紹：

膠原蛋白是結締組織和內臟器官細胞外基質的主要構造成分，但在皮膚、肌腱、骨骼中分布為廣泛。從遺傳和結構上膠原蛋白分為許多類型。膠原蛋白I（Collagen, Type I）是由2個α1鏈和1個α2鏈組成的異源多聚體，在37℃，中性pH下自發形成三螺旋骨架，是一種優秀的細胞培養用基質，廣泛用于肝細胞、成纖維細胞、脊神經節、肌肉細胞、施萬細胞、胚肺細胞、上皮細胞和其他大量細胞系。還能用于研究細胞生長、分化、遷移以及發育過程中的組織形態發生。

懋康生物提供的鼠尾膠原蛋白I是根據Birkedal-Hansen方法，通過醋酸抽提、氯化鈉沉淀、磷suan氫二鈉沉淀等步驟制備。可用于包被細胞培養器皿，培養細胞表面粘附性，特別適合那些在普通培養器皿表面不易貼壁的細胞，比如成纖維細胞、肝細胞等原代細胞。還可用于三維膠的制備，模擬真實的生長環境，使得細胞在三維環境中生長。

本品為溶于6mM HAc的無菌溶液，濃度5mg/ml，每個批次產品皆通過細胞培養測試（包括三維空間培養）以保證質量的可靠性。

注意事項

• 整個操作請于冰上進行，因室溫鼠尾膠原I可迅速成膠，操作過程盡量保持低溫。

• 整個操作請在無菌環境下無菌操作，避免污染以影響細胞生長。

• 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

使用方法

1. 細胞培養器皿的表面包被

組織培養器皿的表面包被推薦濃度為1-5µg/cm²，起始濃度可首玄5µg/cm²。建議根據具體細胞類型來優化。

1.1 6mM HAc稀釋液的制備

本品以溶于6mM HAc（=0.36g/L HAc）的無菌溶液形式提供，本身不溶于中性pH，建議用6mM HAc溶液做進一步稀釋。

配制方法：取34.5µl 冰醋酸（17.4 M）加入100ml雙蒸水，充分混勻后即得到6mM HAc溶液，0.22µm濾膜過濾除菌后待用。

1.2 包被步驟

a，根據自身實驗體系以及優化后的包被濃度來計算所需的膠原蛋白量，并加入相應孔內，確保膠原蛋白溶液*覆蓋表面。

• 以包被濃度為5µg/cm²，先用6mM HAc稀釋液將膠原蛋白（5mg/ml）稀釋到合適的中間濃度，如50µg/ml，

然后參考表1 不同培養皿內膠原蛋白加量表 來加量到各孔內；

• 以包被濃度為2µg/cm²，先用6mM HAc稀釋液將膠原蛋白（5mg/ml）稀釋到合適的中間濃度，如12µg/ml，然后參考表1 不同培養皿內膠原蛋白加量表來加量到各孔內；

表1 不同培養皿內膠原蛋白加量表

b，室溫孵育1h，小心吸掉多余液體，用無菌PBS清洗3~4次后直接使用。或者加完膠原蛋白溶液后，在超凈臺內開蓋過夜晾干。無菌條件下，包被好的器皿在4-25℃至少可保存3個月。

2. 三維膠原的制備

當鼠尾膠原蛋白I使用濃度>1mg/ml，pH 7.0左右皆可形成具有一定強度的三維膠，建議成膠濃度為1-2 mg/ml。

由于本品是以溶于6mM HAc的無菌溶液形式提供，在成膠過程需先加入0.06倍體積的0.1M NaOH中和。

2.1 需要溶液準備（無菌、預冷）

2.2 三維膠原制備（不含細胞）（以配制1ml，1mg/ml三維膠為例）：

2.3 三維膠原制備（含細胞）（以配制1ml，1mg/ml三維膠為例）：

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— —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

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Collagen, Type I, from Rat Tail 鼠尾膠原蛋白I 細胞培養

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