
熒光素-5-馬來酰亞胺(巰基染料)探針
簡要描述:
熒光素-5-馬來酰亞胺(巰基染料)探針(Fluorescein-5-maleimide)是一種活化的熒光分子(Ex/Em=494/518nm),能非常容易的將熒光素連接到蛋白上。馬來酰亞胺基團在pH 7的加體系內與半胱an酸側鏈上的巰基基團反應,形成一穩定的硫醚鍵。
產品時間:2026-07-09
Fluorescein-5-maleimide (Thiol Dye)
熒光素-5-馬來酰亞胺(巰基染料)
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重要提醒(購買或初次使用前)請務必查閱:
一、熒光染料(粉末形式,特別是對氧敏感探針)配制儲存液的注意事項 |
1)熒光探針在固體(粉末)狀態很穩定,按照說明書要求溫度來保存,效期內使用即可。 2)熒光探針用有機溶劑比如:DMSO,溶解配制成儲存液之后,一般來說,放到-20℃保存(2-3個月內使用,甚至更短,具體可咨詢);放到-80℃保存(6個月內使用,具體可咨詢)。前提是,使用的有機溶劑必須是高質量且無水的,特別是DMSO,必須是新鮮開封。 3)配制的儲存液請務bi用密封性好且螺旋蓋的低容量凍存管保存(不可用EP管),至少按照5-10ul/管來分裝,避光凍存。 4)對于某些特殊化合物(對空氣敏感或存在不穩定結構),可能保存周期特別短,甚至只能當天使用。這些化合物說明書上會有說明。
有更多信息,請聯系我司工作人員來核實。 |
二、熒光染料(以溶于有機溶劑的儲存液形式提供)的注意事項 |
1) 以溶于有機溶劑的儲存液形式的熒光探針相對來說是比較穩定的化合物;但收到這類產品,也需用戶根據單次用量(5-10ul/管來分裝),-20℃以下密封避光保存,減少反復凍融次數。 2) 請務bi用密封性好且螺旋蓋的低容量凍存管保存(不可用EP管)。務必避光。
有更多信息,請聯系我司工作人員來核實。 |
產品標簽
Fluorescein-5-maleimide 熒光素-5-馬來酰亞胺;ABD-F;Thiol Dye 巰基染料; WSP-1 (H2S Probe);CAS:75350-46-8;
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | CAS NO. | 規格 | 價格(元) |
| Fluorescein-5-maleimide (Thiol Dye) | MX5317-10MG | 75350-46-8 | 10mg | 580 |
| Fluorescein-5-maleimide (Thiol Dye) | MX5317-25MG | 75350-46-8 | 25mg | 1180 |
| Fluorescein-5-maleimide (Thiol Dye) | MX5317-50MG | 75350-46-8 | 50mg | 2080 |
產品描述
熒光素-5-馬來酰亞胺(Fluorescein-5-maleimide)是一種活化的熒光分子(Ex/Em=494/518nm),能非常容易的將熒光素連接到蛋白上。馬來酰亞胺基團在pH 7的體系內與半胱氨suan側鏈上的巰基基團反應,形成一穩定的硫醚鍵。馬來酰亞胺基團在pH 7時與游離巰基反應活性比胺基強~1000倍。而在pH>7.5與伯胺的反應活性提高,且會發生馬來酰亞胺基團水解現象。熒光素-5-馬來酰亞胺能用來標記蛋白,用于檢測構象變化,多亞基復合物的組裝和配基結合過程。
產品特性
1) CAS NO:75350-46-8
2) 化學名:1-(3',6'-Dihydroxy-3-oxospiro[isobenzofuran-1(3H),9'-[9H]xanthen]-5-yl)-1H-pyrrole-2,5-dione
3) 同義名:5-Maleimido-fluorescein; 5-MF; N-(5-Fluoresceinyl)maleimide; 5-馬來酰亞胺熒光素;
4) 分子式:C24H13NO7
5) 分子量:427.37
6) 純度:>97%
7) Ex/Em:494/518nm
8) 外觀:淺橘色至深橘色和淺紅色至深紅色粉末
9) 溶解性:溶于DMSO、DMF
10) 反應基團:馬來酰亞胺,與巰基反應(pH 6.5-7.5)
11)化學結構圖:
保存與運輸方法
保存:-20℃避光干燥保存,二年有效。
運輸:冰袋運輸。
注意事項
1) 馬來酰亞胺對濕度很敏感。需將本品保存在-20℃,保持干燥。開蓋前一定要將本品放到室溫回溫,以避免產品受潮而凝結成團。
2) 使用前才配制試劑。不可將試劑保存在水溶液內。
3) 用熒光素-5-馬來酰亞胺標記的分子必須含有游離的巰基(-SH)。某些含巰基分子在溶液中可能被氧化,形成二硫鍵,從而不能與馬來酰亞胺反應。二硫鍵可被還原生成游離巰基。還原后,大部分的還原劑必須在偶聯反應前去除。
4) 偶聯反應體系內不要引入含巰基組分,因其會與馬來酰亞胺反應,進而抑制和降低目的分子的連接率。
5) 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
標記方法【僅做參考】
需根據具體應用來優化以下標記步驟。
A、 標記蛋白
1) 于20mM 磷酸鈉緩沖液,150mM NaCl,pH 7.2或其他適合的緩沖液(pH 6.5-7.5)內準備含巰基樣品。為了預防金屬催化生成二硫鍵,體系內加入終濃度5-10mM的EDTA。
2) 往樣品內加入摩爾量遠高的熒光素-5-馬來酰亞胺。通常情況,使用25倍高的摩爾比能得到理想結果。【注意】:熒光素-5-馬來酰亞胺能直接加入水溶性溶液(高達1mM濃度)或首先溶解在DMF(10mM)在加入蛋白溶液中。
3) 進行偶聯反應,室溫2h或4℃過夜。
4) 用截留分子量(MWCO)為10 kD的脫鹽柱或透析袋來去除未結合的熒光素。
5) 將偶聯好的蛋白或多肽避光保存在4℃,穩定保存高達一個月。或按照單次用量分裝,保存在-20℃。
B、 計算標記效率
【注意】:為了得到的結果和精確測定標記率(F/P值),需完quan去除未反應的熒光素。有必要稀釋少量脫鹽或透析樣本。
1) 使用1cm比色皿,測定標記蛋白在280nm和495nm處的吸光值。
2) 計算蛋白濃度。
ε=蛋白摩爾吸光系數(比如,IgG的摩爾吸光系數~210,000 M-1cm-1)
Amax=A495
CF=校正系數=A280/Amax=0.3000
×稀釋倍數
3) 計算標記效率
ε′=熒光素摩爾吸光系數:68,000 M-1cm-1
摩爾熒光素/摩爾蛋白= × 稀釋倍數
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— —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學和生物技術領域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務工作,主要從事細胞生物學、植物學、分子生物學、免疫學、生物化學、蛋白組學。生物制藥與診斷試劑研發生產等領域。 本公司秉承“以人為本,以誠為信、合同守信"的經營理念。堅持"品質保障"的原則為廣大客戶提供優質產品。


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